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黑水虻作为虹鳟潜在饲料原料的价值评估:对肌肉品质的影响
Santos AFBD著, 周艳玲, 胡敏春, 张若然译
 
摘要:鱼粉和鱼油仍是水产饲料中主要的蛋白和脂质源。全球可利用性的下降和这些资源的高价格使业界不得不寻找更可持续的替代品。最近昆虫的潜力得到了证实。作为鱼粉的替代蛋白源,昆虫或许是一个很好的选择。过去十几年中,在鱼饲料中用昆虫替代鱼粉的研究取得了可喜的成绩,鼓舞我们做进一步的研究。黑水虻是一种价值很高的饲料原料。虹鳟是欧洲主要的淡水鱼类,由于饲料价格的不断升高,导致这种鱼在集约化养殖中盈利下降。因此,本研究旨在开发虹鳟鱼可持续的饲料,通过黑水虻粉部分替代鱼粉对虹鳟的影响来进行最终的效果评价。因此,设计了黑水虻粉替代鱼粉水平(0, 25和50%)对虹鳟肌肉品质的影响的试验。此外,对虹鳟的储藏时间和烹饪品质进行了测定。结果表明,黑水虻粉替代鱼粉的两个水平,对虹鳟的肌肉形态、商品价值和物理特性(包括颜色、PH值、质地和保水性)均没有影响。然而,高剂量的黑水虻粉替代会增加蒸煮损失值,而生、熟鱼肉的近似成分不受饲料影响。相反的,肉的脂肪酸质量指标Ti,AI,HH,pufan3 / pufan6和PUFA/SFA,因黑水虻粉的替代出现较大影响,饱和脂肪酸含量增加,而单不饱和脂肪酸和长链多不饱和脂肪酸(尤其是二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸)含量下降。有趣的是,黑水虻粉的替代使脂质过氧化物减少。正如预期一样,存储时间的增加对几乎所有测试变量都有负面影响。然而,需要进一步的研究来提高黑水虻的营养价值,尤其是那些有关脂肪酸的方面。总的说来,黑水虻粉替代水平高达50%对虹鳟鱼的品质影响较小,然而,投喂昆虫饲料的鱼肌肉饱和脂肪酸含量增加,单不饱和脂肪酸和长链多不饱和脂肪酸含量降低,使得脂质过氧化物减少。
关键词:可持续水产饲料;黑水虻粉;虹鳟;肉品质
由于蛋白质和脂肪的含量,黑水虻被认为是一种价值很高的饲料原料。它们含有40~44%的蛋白(干物质基础),氨基酸特别是赖氨酸尤其丰富(为蛋白的6~8%)。脂肪和脂肪酸的组成很大程度取决于它们的食物中脂肪酸的量(St-Hilaire et al., 2007)。为此,黑水虻体内的脂肪和脂肪酸含量是可以控制的。因此,把富含ω-3脂肪酸的饵料培养成食物来饲喂它们,是一种富集ω-3脂肪酸的方法(St-Hilaire et al., 2007)。黑水虻的粗灰分含量很高但很有用,占干物质的11~28%,它们含有丰富的钙(干物质的5~8%)和磷(干物质的0.6~1.5%)(St- Hilaire et al., 2007b; Tran et al., 2015)。新鲜的幼虫干物质含量相对较高(35-45%),这使得他们比其他的新鲜产品更容易脱水且成本更低(Newton et al., 2008)。
在水产饲料中添加黑水虻的效果有限,然而,这方面的研究却不断深入。黑水虻在斑点叉尾鮰和奥利亚罗非鱼上的研究表明,单独喂或与商品饲料组合(50%幼虫和50%商品饲料)投喂,与投喂基础饲料组相比,体重和体长没有显著差异。这些研究还表明,饲喂昆虫的斑点叉尾鮰和奥利亚罗非鱼的味道和质地也已被消费者接受(Bondari Sheppard, 1981)。然而,后来在鲶鱼上的研究却没有很好的效果,昆虫会使在笼中养殖的亚成年鲶鱼生长缓慢,而不会显著降低养殖槽中鲶鱼的生长速度。另一方面,用黑水虻100%替代鱼粉在斑点叉尾鮰和奥利亚罗非鱼上没有很好的生长性能,由于没有足够的干物质和粗蛋白。张等(2014)证实,与对照组相比,用25%的黑水虻粉替代鱼粉对黄颡鱼的生长和免疫指标没有显著差异。
kroeckel等人分别用 0%, 17%, 33%, 49%, 64%,和76%的脱脂黑水虻粉替代鱼粉的饲料饲喂大菱鲆幼鱼,虽然表现出较好生长性能,但由于低的适口性,随着黑水虻粉替代量的增加摄食量降低,生长性能受饲料中黑水虻粉量的影响。所有含有黑水虻粉的实验组特定生长率较低,而饲料转化率在黑水虻粉量超过33%时显著升高,甲壳素的存在可能影响饲料的摄食量、可用性和消化率,从而影响生长性能,体蛋白含量不受处理的影响,但体脂随着黑水虻粉量的增加而降低(Kroeckel et al., 2012)。 Lock等分别用25, 50和100%的黑水虻粉替代鱼粉的,评估了黑水虻粉对大西洋鲑的影响:不同的养分分离和加工技术把黑水虻粉分为A和B两种, A25, A50 和A100组的效果与对照组等同。随着黑水虻粉量的增加其摄食量有所下降,饲料转化率也下降,导致鱼的净增长。其肉在组织学和感官上没有显著差异,作者指出,黑水虻粉营养素的分离和加工工艺对产品有重要影响(Lock et al., 2014)。利用25%或50%的黑水虻替代鱼粉在虹鳟上也有研究(St-Hilaire et al., 2007),结果表明,25%的替代比例对饲料转化率没有影响,而摄氏50%的替代量的饲料的鱼总增重下降(St-Hilaire et al., 2007)。Sealey等人用25%和 50%黑水虻蛹粉替代鱼粉在虹鳟上做了另一个试验,发现虹鳟内脏增加,饲喂富含黑水虻粉的鱼的生长与喂对照组饲料的鱼无显著差异,而喂含黑水虻正常量的饲料的鱼的生长显著低于喂对照组饲料的鱼(Sealey et al.,2011)。由30个未经训练的人员组成的小组没有检测到各实验组饲料之间的营养水平无显著差异(Sealey et al., 2011)。
本项研究的目的在于发展虹鳟更可持续的水产饲料,解决饲喂虫粉的鱼肉质的问题,并对鱼肉的保质期进行研究。因此,分别用25%和50%的黑水虻粉替代鱼粉,研究对虹鳟肉质地、商品特性及在冷藏下对肉质物理和化学特性的影响。

1. 材料与方法
1.1试验饲料
饲料原料,黑水虻和脱脂豆粕由Hermetia Deutschland GmbH 和 Co. KG公司提供(德国)。黑水虻养在笼子里,它们完全变态的生命周期得到控制。根据欧洲立法(1069/2009种动物副产品)用黑面包和麦麸喂养黑水虻,只有这样才能作为饲料原料。黑水虻在-20℃下冷冻48 h后干燥,干的黑水虻(90%干物质)通过高压进行脱脂处理。
三种试验饲料的粗蛋白为45%,粗脂肪为15%,能量为22 MJ/kg,其中对照组 (HI0)的饲料主要蛋白源来自于鱼粉 (FM);其他两种试验饲料分别为,25% (HI25) 和50% (HI50)黑水虻粉替代鱼粉。所有混匀,并用商用绞肉机做成2.5 mm 粒径的饲料,在60℃下干燥48 h,过筛后保存于-20℃下。试验饲料的配方及营养组成、总氨基酸、游离氨基酸和脂肪酸含量分别见表1、表2和表3。
 
表1试验饲料配方及营养组成
    Diet  
       
  HI0 HI25 HI50
       
Ingredient (g kg-1 DM)      
FM1 600 450 300
HI meal2 0 200 400
Wheat meal3 40 40 40
Wheat bran4 90 60 30
Starch gel, D5005 150 150 150
Fish oil6 90 70 50
Mineral mixture7 15 15 15
Vitamin mixture8 15 15 15
Proximate composition (% DM)      
Dry matter 96.36 96.48 95.88
Crude protein 41.10 39.84 40.25
Crude lipids 14.72 15.07 14.62
Ash 12.72 11.30 10.22
NDF9 3.27 3.42 7.19
ADF10 2.44 3.10 4.52
NFE11 30.11 31.48 31.24

Fishmeal (90.4% DM, 66.7% crude protein, 8.3% crude lipids, 14.9% ash); Corpesca S.A., Santiago, Chile.
2   Hermetiaillucensprepupae defatted meal (93.09% DM, 52.82% crude protein, 22.49% crude lipids, 6.38% ash);Hermetia Deutschland GmbH & Co. KG, Germany.
Wheat meal, Molino Spadoni S.P.A., Ravenna, Italy.
Wheat bran, FA.MA.AR.CO S.P.A., Cuneo, Italy.
Starch gel, UNIVAR S.P.A., Milan, Italy. 
Fish oil, GUGLIELMO PEARSON S.R.L., Genoa, Italy. 
Mineral mixture (g kg-1): dicalcium phosphate, 500 g; calcium carbonate, 215 g; sodium salt, 40 g; potassium chloride,
90  g; magnesium chloride, 124 g; magnesium carbonate, 124 g; iron sulphate, 20 g; zinc sulphate, 4 g; copper sulphate, 
3  g; potassium iodide, 4 g; cobalt sulphate, 0.02 g; manganese sulphate, 3 g; sodium fluoride, 1 g; GrandaZootecnici S.R.L., Cuneo, Italy.
Vitamin mixture (IU or mg kg-1): DL-α-tocopherol acetate, 60 IU; sodium menadionebisulphate, 5 mg; retinyl acetate, 15000 IU; DL-cholecalciferol, 3000 IU; thiamin, 15 mg; riboflavin, 30 mg; pyridoxine, 15 mg; vitamin B12, 0.05 mg; nicotinic acid, 175 mg; folic acid, 500 mg; inositol, 1000 mg; biotin, 2 mg; calcium panthotenate, 50 mg; choline chloride, 
2000 mg; GrandaZootecnici S.R.L., Cuneo, Italy.
9Neutral detergent fibre, NDF (%) = [(weight in g at 105 °C) - (weight in g at 500 °C)]*100. 10Acid detergent fibre, ADF (%) = [(weight in g at 105 °C) - (weight in g of empty crucible)]*100. 11Nitrogen-free extract, NFE (%) = 100-%CP-%CL-%CF-%Ash.

 
表2试验饲料的总氨基酸含量(µmol/mg干物质)及氨基酸组成
      Diet  
         
    HI0 HI25 HI50
Essential AA Arginine 0.002 0.003 0.003
Histidine 0.001 0.002 0.002
Isoleucine 0.001 0.002 0.002
Leucine 0.003 0.004 0.004
Lysine 0.002 0.003 0.002
Methionine 0.001 0.000 0.000
Phenylalanine 0.001 0.001 0.002
Threonine 0.001 0.002 0.002
Valine 0.002 0.003 0.003
on-essential AA Alanine 0.002 0.003 0.003
Asparagine 0.002 0.003 0.003
Cystine 0.000 0.000 0.000
Glutamine 0.003 0.006 0.009
Glycine 0.003 0.004 0.005
Hydroxyproline 0.000 0.000 0.000
Proline 0.002 0.007 0.012
Serine 0.001 0.002 0.002
Taurine 0.022 0.017 0.011
Tyrosine 0.001 0.002 0.002
 
 
表3试验饲料脂肪酸含量(占总脂肪酸的百分比)
    Diet  
       
  HI0 HI25 H50
       
C12:0 3.30 14.43 24.41
C14:0 4.81 5.94 7.03
C16:0 12.80 12.74 12.53
C18:0 2.68 2.54 2.39
SFA 24.56 36.52 47.06
C16:1n7 5.97 5.51 5.27
C18:1n9 12.75 12.41 10.82
C18:1n7 3.03 2.43 1.85
C20:1n9 5.28 4.13 3.32
C22:1n11 4.28 3.37 2.78
MUFA 33.74 29.85 25.77
C18:2n6 3.12 4.20 4.79
PUFAn6 4.67 5.41 5.59
C18:3n3 1.05 1.13 1.02
C20:5n3 10.35 7.72 5.92
C22:5n3 1.50 1.28 0.98
C22:6n3 19.47 14.54 11.08
PUFAn3 35.62 27.16 20.87
The fatty acids SFA: C13:0, C15:0, C17:0, C20:0, C22:0, C24:0; MUFA: C14:1n5, C16:1n9, C17:1, C20:1n11, C20:1n7, C22:1n9, C22:1n7; PUFAn1 C16:4n1, C18:4n; PUFAn4: C16:2n4, C16:3n4, C18:2n4, C18:3n4; PUFAn6: C18:3n6 C20:2n6, C20:3n6, C20:4n6, C22:2n6, C22:4n6; PUFAn3, C20:3n3, C20:4n3, C21:5n3 were also detected, in percentage < 1%, but not reported in the table for brevity. They were anyway utilized to calculate the fatty acid groups and the total fatty acids.
试验鱼及饲养管理,从当地农场(TroticolturaBessignana, Beinette, Cuneo, Italy) 购买虹鳟(Oncorhynchusmykiss)幼鱼,在适当的条件下,将虹鳟运回置于DISAFA,(Unversity of Turin (Italy) )的试验装备中。饲养试验开始前,试验鱼户外进行驯化3周,并投喂从斯克雷廷意大利获得的特定虹鳟饲料(Verona, Italy; www.skretting.it)。在驯化期过后,挑选初重为179 ± 10 g 的虹鳟360尾,随机置于12个容量为1000L的矩形玻璃纤维水箱中,养殖供水为开放和连续的淡水系统,进水速度为8 L/min。

1.2样品采集
养殖试验(78天)结束后,将所有的鱼称重,并从每缸(每个处理28尾鱼)挑选7尾鱼麻醉(MS-222;60 mg L-1;法玛克公司、英国)处死。将鱼存贮在冰箱中,用于对形态、商品和质量性状进行分析。为了研究鱼在冷藏条件下(1°C)的贮藏效果,分别对贮存1、3、6和9天的样品进行分析。在贮藏过程中,所有的鱼都放置在密闭的聚苯乙烯盒子里,底部开洞,用冰覆盖。在不同的贮存时间,鱼(总数12尾,每个处理组4尾)进行形体测量,随后从左右两侧分离鱼片。对右侧生鱼片进行分析,而左侧鱼片则熟化后分析。将左鱼片进行称重,真空包装在塑料袋中,置于沸水(95-98°C)中煮5分钟,直到内部温度到达58°C;然后取出样品,室温冷却,将鱼片从袋子里取出,再称重。对全鱼和鱼片(生或熟)做细致分析,如下所示。

1.3形体和商品性状
每条鱼称重并进行以下指标测量:肌肉总长度(cm)、头长(cm)和最大高度(cm)。解剖分离肝脏、肌肉和内脏(全脏器和分离肝),将净膛体,右角、左角、右眼皮肤、鳍和头称重。
测定长度和重量,计算去除内脏重(DY)、出肉率(FY)(有无皮)、躯壳、鳍、头百分比、肥满度(CF)和流失率计算公式如下:
DY(%)=[全净膛重(g)/体重(g)]x 100
有皮FY(%)=[右侧的重量(g)+左侧的重量(g)/体重(g)]x 100
无皮FY(%)=[(右侧的重量(g)—右侧的皮重量(g)x 2 )/体重(g)]x 100
躯壳百分比(%)=[躯壳重量(g)/体重(g)]x 100
鳍百分比(%)=[鳍重量(g)/体重(g)]x 100
头部百分比(%)=[头部重量(g)/体重(g)]x 100
肥满度=[体重(g)/体长3(cm)]x 100
流失率(%)=[躯壳+鳍+头部+内脏重(g)/体重]x 100

1.4物理分析
1.4.1颜色、PH值和质地
用spectrocolour®116色度计(Bell Technology Ltd,奥克兰,新西兰),利用光谱QC 3.6软件,根据CIELAB系统(CIE,1976)在鳃和生鱼片、熟鱼片上进行颜色测量。在这个系统中,透明度(L *)从0到100%,即从黑到白;红色指数(*)的范围从红色(+ 60)到绿色(-60),黄色指数(b)范围从黄色(+ 60)到蓝色(- 60)。色度和色调值计算公式如下:
色度=a * 2 + b * 2
色调= a* × tan (b*,a*) × 2
脊柱轴上方、柱轴下方和尾部鱼片分别进行颜色测定。最后,鱼片的颜色为三个点测量的平均值。对于生鱼片,三分别对脊柱轴上方的头部、中部和尾部肌肉pH值进行测量,平均值被用于数据分析。pH值的测量,利用穿刺性电极(MettlerToldedo公司)的梅特勒-托利多devengo SG2™pH计(Novate Milanese, Milano,,意大利)。
用1千牛负载细胞Zwick Roell®109构造仪(ZwickRoell,乌尔姆,德国)和由文本专家II软件提供的应用进行质地分析。华纳BRATZLER(WB)剪切试验是在一个从鱼片的脊柱轴上方的颅部获得的肌肉样本(每片肌肉测量一次)。切刀(宽度为7厘米),垂直于肌肉纤维方向,用速度为30毫米/分钟切至总变形50%。最大剪切力,定义为样品的最大抗剪力(veland和Torrissen,1999),是从力(N)与变形(%)的比较确定。分别在生鱼片和熟鱼片中进行质地测量。

1.4.2保水性和蒸煮损失
持水能力(WHC),只有在生鱼片测量,根据艾德等人(1982)并通过赫尔特曼和Rustad提出修改(2002)的方法,经离心分离后的水损失率确定。肌肉切碎并取2g置于装有过滤网的塑料管上,于1500 rpm离心5分钟后进行分析。最后,持水力计算为初始重量和离心后的总重量之间的差异,其值为离心前样品中的水含量,由初始重量差和105℃烘干24小时后确定。每个样品测量两次。
在熟鱼片上,蒸煮损失(CL)是通过测量烹饪前和之后的鱼片重量的差异来计算的,根据公式:蒸煮损失(%)=[煮熟的样品重量(g)/生样品重量(g)] x 100。
物理分析后,所有鱼片切碎。部分鱼片冷冻在−80°C和冻干−18°C (HetoPowerDry AC300-H freeze-dryer, Rodano, Italy)。经冷冻干燥后,样品迅速称重后,暴露于空气中24小时,再次称重。最后将样品用粉碎机粉碎,然后避光保存在4°C的塑料袋中,直到用于分析。

1.5化学分析
1.5.1体成分
体成分、饲料成分以及冻干鱼片成分是根据AOAC测定(2000)方法:干物质(在烘箱里烘105°C至恒重)是根据950.46法,灰分(焚烧550°C 5 小时)按920.153的方法,粗蛋白质(N×6.25)酸消化后,用凯氏定氮法(Kjeltec 2300全自动生化分析仪、TecatorHöganas,瑞典)按照976.05的方法测定,粗脂肪用石油醚于Soxtec系统 (Extraction unit model 1043 and service unit model 1046, Tecator Systems, Höganäs, Sweden)按991.36的方法提取。测定第一天和第九天所有样品的体成分(生、熟),来确定开始(死后第一天)及在冷藏结束(第九天)后的化学成分。粗纤维测定先用硫酸和氢氧化钠溶液消化,然后残渣煅烧。煅烧前后重量的差异表示样品中粗纤维的含量。中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)是根据 Goering和Van Soest (1970).的方法测定。
利用Folch等人(1957)调整的方法测定饲料、生鱼片及熟鱼片总脂肪含量。取样品各2克通过ULTRA-TURRAX®(ULTRA-TURRAX model T25, Staufen, 德国)置于氯仿-甲醇(2:1,V/V)溶液中3分钟,然后过滤。为了得到有效的提取和分离,向蒸馏水中加入0.88%氯化钾到滤液至氯仿:甲醇:水比例为8:4:3。静置24小时以获得双相系统。下相为含有溶解在氯仿中脂类,回收。将已知体积的氯仿和脂质悬浮在真空蒸发(5毫升)以去除溶剂(氯仿),0.5毫升的脂质被提取利用,测定总脂含量。提取的脂肪用于脂肪酸的分析。
脂肪酸
饲料和鱼片中脂肪酸分析,采用墨里森和史米斯(1964)的改良方法。在甲醇中加入0.5 M KOH进行油脂皂化,加2 N HCl进行FAs水解。用14%浓度的氟化硼甲醇制备甲基甲基酯。将甲基脂肪酸溶于石油醚、干燥,最后用1毫升己烷溶解。使用含有离子化检测器(FID)的气相色谱仪Varian GC 430(Agilent, Palo Alto, CA,,美国)测定FAs成分(GC);利用™SupelcoOmegawax 320毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25μM膜和聚乙二醇组合;Supelco, Bellefonte, PA, 美国)。烘箱温度在100℃下保持2分钟,以12℃/分钟的速度在4分钟内增加到160°C,然后在14分钟内以3℃/分钟的速度增加到220°C,并在220℃保持25分钟。喷油器和检测器温度分别设置在220°C和300°C。1μL正己烷样品被注入柱中,载气(氦气)保持恒定的流量为1.5毫升/分钟。分流量比为1:20。色谱图在该色谱数据系统1.9.302.952计算积分软件记录。Fas通过比较FAME的保留时间与标准Supelco 37 成分与FAME混合物来确定(Supelco)。用蜂酸量化个别FAs(c23:0)(Supelco)作为内部标准。FAS表示占总FAME的百分比。从FAs描述,脂肪的质量指标如动脉硬化指数(AI)脂肪的和血栓形成性指标(TI)根据乌布利希和南门(1991)计算。降胆固醇/高胆固醇血症FA比(HH),根据SantosSilva等人(2002)计算。公式如下:
AI (%) = [C12:0 + (4 × C14:0) + C16:0] / (Σn3 PUFA + Σn6 PUFA + ΣMUFA)
TI (%) = (C14:0 + C16:0 + C18:0) / [(0.5 × ΣMUFA) + (0.5 × Σn6 PUFA) + (3 × Σn3 PUFA) + (Σn3 PUFA / Σn6 PUFA)]
HH (%) = (C18:1n9 + C18:2n6 + C20:4n6 + C18:3n3 + C20:5n3 + C22:5n3 + C22:6n3) / (C14:0 + C16:0)
此外,计算 PUFAn6/PUFAn6, PUFAn6/PUFAn3 和PUFA/SFA比值。
脂质氧化产物
共轭二烯烃含量(CDS)和三烯(CTS)参考Srinivasan等人(1996)的比色法,以己烷为溶剂测定。使用 29 000 L/ mol cm的摩尔消光系数,在233nm 处测得CDs(50扫描配备紫外分光光度计软件,Varian, Palo Alto, CA, 美国)。结果表示为mmol CD/kg样品。使用 29 000 L mol−1 cm−1的摩尔消光系数,在268 nm处测得CTs(50扫描配备紫外分光光度计软件赢得卡里,瓦里安,帕洛阿尔托,CA,美国)。结果表示为mmol CT/kg样品。
根据Salih等人(1987)的方法,硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)采用比色法在532 nm处测定。添加50g/L硫代巴比妥酸(TCA)和0.04 mol /L叔丁醇(TBA)来提取TBARS。在97°C孵育40分钟后,在50 g /L TCA(0.8–8μmol /L)的校准曲线定位1,1,3,3-四乙氧基丙烷(TEP)测定产量。结果表示为mg MDA(丙二醛)/kg样品。
在玻璃管中称(1毫克)样品,总氨基酸(TAA)的提取根据波滕扎(2013)等人调整的方法测定。然后,在200μL 6 mol /L盐酸溶液中在120°C水解24小时。水解后,加入500μl 0.1 mol /L盐酸,并将样品提交到柱前进行衍生。每个样品收集10μl溶液,放在一个含70μL  0.0655NaOH溶液及硼酸盐缓冲液和20μL超剂粉溶液(6-aminoquinolyl-N-氨基甲酸酯、甲酸酯)的玻璃瓶中。每个周期分析,每个标准(CS)含有17种蛋白氨基酸,缬氨酸,牛磺酸和羟脯胺酸,在10 pmol/μL浓度中被利用,半胱氨酸在浓度为5 pmolμL-1被利用。将40μL 2.5 mmol /L氨基酸标准溶液,20μL 5 mmol/ L缬氨酸,20μL 5 mmol /L Tau和20μL 5 mmol /L羟脯胺酸置于880μL 超纯水中制备溶液。将CS(10μL)放置在70μL硼酸盐缓冲液和20超剂粉末中。所有的样品混合,加热到55°C ,10min完成的衍生反应,并注入超高效液相色谱仪分析。
游离氨基酸(FAA)的分析,从每个样品(昆虫饲料,实验饲料和冷冻干燥的鱼肌肉)取100毫克在5毫升的0.5米高氯酸(PCA)中用超声波匀浆20分钟,并在热水浴中混合(300 rpm 60°C过夜)。离心后(4000℃旋转25℃,10min),取10 μL上清液置于玻璃瓶内。最后,样品进行柱前衍生化(如总氨基酸测定)和超高效液相色谱分析。
超高效液相色谱条件
AccQ•Tag试剂盒(硼酸盐缓冲液和试剂),AccQ•Tag超剂A和B,高效液相色谱级乙腈、氨基酸标准溶液均购于Waters (Miliford, MA, USA)。氢氧化钠和恒沸盐酸溶液由 Merck (Darmstadt, Germany)供应。Norvaline (Nval)从 Sigma-Aldrich S.r.l. (Milan, Italy)购买。超纯水由Millipore, Milli-Q system (Massachusetts, USA)纯化。TAA和FAA结构由设有acquitytm调谐紫外线(TUV)检测器(检测波长260 nm)和Acquity UPLCTM柱(BEH C18,2.1 x 100毫米,1.7μμm的颗粒粒径)的超高效液相色谱(UPLCTM)系统(Waters, Miliford, MA, USA) 测定。使用了两种不同的洗脱剂:A(稀释比例为1:20 AccQ•Tag洗脱液A与超纯水)和B(AccQ•Tag洗脱液B)。梯度洗脱程序为:0.54 min,5.74 min,0.1% B;9.1% B;8.73 min,9.50 min,0.1% B;0.1% B柱温为55°C,流速为0.7 ml·min-1,注射量为1μL(局部环)。数据通过Waters Empower™™色谱软件版本2收集和分析。

1.6统计分析
数据采用双因素方差分析 (SAS Inst. Inc., Cary, NC)。饲料 (3 个水平: HI0, HI25, HI50)和贮存时间(4个时间:T1、T3、T6、T9),它们之间的相互作用被考虑,旨在研究它们是否对评价指标影响显著。采用T-检验方法 (SAS Inst. Inc.),在P<0.05差异显著。体重固定,以防止由于这种因素的影响而掩盖了饲料和储存时间对评价指标的影响。

2. 结果
2.1形体和商品特性
所有实验饲料均被鱼立即食用,试验期间无死亡。表4的形体指标和商品特性是指按饲料分组的个体的平均值计算,而不是储存时间。此外,还显示了饲料、储存时间和体重的影响。只有体重显著受饲料影响。HI25组鱼体体重最高,而HI50组鱼体体重显著高于对照组(0),但HI0和HI25组无显著差异。饲料、储存时间及它们的相互作用和体重没有显著影响。
 
表4实验鱼的形体和商品特性相关指标
    Diet (D)     Significance   RSD1
  HI0 HI25 HI50 D T2 DxT W3  
Body weight, g 557.494b 646.90a 593.97ab * ns ns - 97.66
Total length, cm 37.48 38.69 38.21 ns ns ns ns 1.83
Muscle length, cm 34.58 35.80 35.39 ns ns ns ns 1.79
Frame, % 9.75 8.45 9.53 ns ns ns ns 2.30
Fins, % 1.24 1.08 1.25 ns ns ns ns 0.27
Head, % 14.11 13.75 13.69 ns ns ns ns 1.10
Total wastes, % 25.10 23.30 24.47 ns ns ns ns 2.60
Dressed yield, % 88.01 86.06 88.38 ns ns ns ns 4.51
Fillet yield with skin, % 61.71 63.57 62.97 ns ns ns ns 2.74
Fillet yield without skin, % 53.20 55.50 55.05 ns ns ns ns 3.75
Condition factor, g/cm3 1.05 1.11 1.06 ns ns ns ns 0.08
Means in the same row with different superscript letters are significantly different; ns: not significant; *: p < 0.05; 1Residual Standard Deviation; 2Time; 3Body weight.

2.2物理分析
2.2.1颜色分析
左鳃的颜色值是按饲料和储存时间分组的个体的平均值表示,见表5。饲料、时间及它们的相互作用和体重的影响也在同一表中表达。不同饲料的鱼的左鳃在颜色上没有差异。与此相反,时间对所有颜色指标影响显著,因为存储过程中的颜色变化以皮肤,鳃和肌肉为主。L*值,它代表透明度和色相值,这代表我们如何感知颜色,从T1下降到T3,但在此期间保持稳定,T3、T6、T9间没有显着差异。相比之下,红色指数(*)、黄色指数(B)和色调,这是色彩饱和度,在第一阶段储存时增加(从T1到T3),其余的时间保持稳定,T3、T6、T9没有显著差异。饲料和时间的相互作用不显著,表明个体投喂不同的饲料在冷藏过程中呈现出相似的颜色特征演变。体重对左鳃颜色无明显影响。
 
表5投喂不同试验饲料鱼的鳃颜色值
    Diet (D)     Time (T) *   Significance RSD1
Colour HI0 HI25 HI50 T1 T3 T6 T9 D   T  DT W2  
L*3 19.33 18.47 18.89 43.90a 11.89b 6.91b 12.88b ns *** ns ns 8.12
a*4 21.52 23.73 23.05 2.74b 32.55a 28.77a 27.01a ns *** ns ns 9.66
b*5 9.79 10.28 10.40 4.00b 13.78a 11.01a 11.84a ns ** ns ns 5.35
Chroma6 24.51 26.57 25.84 6.52b 35.52a 30.87a 29.65a ns *** ns ns 10.67
Hue7 33.99 36.54 33.29 73.58a 21.98b 19.24b 23.60b ns *** ns ns 8.05
Means in the same row with different superscript letters are significantly different; ns: not significant; **: p < 0.01; ***: p < 0.001. * As interaction (DxT) was not significant, each value represents the means for the three diets. 1Residual Standard Deviation; 2Body weight; 3Lightness; 4Redness; 5Yellowness; 6Saturation; 7Perception of colour.
在表6中,生鱼片和熟鱼片的颜色值是按饲料和储存时间分组的个体的平均值。饲料、时间及它们的相互作用和体重的影响也被表达。与左鳃一样,饲料及其与时间的交互作用对肌肉的颜色值没有显著影响。在生鱼片上,时间对L*有显著的影响(p<0.001),且与鳃的下降趋势相同。而在煮熟的鱼片上,时间对L*,b*和色度值有显著的影响。与在其他存储时间分析的样品相比,这三个指标,煮熟的样品在T3显示出较高的值。体重对生鱼片的色度和色相值和熟鱼片的色相值有显著的影响(p<0.05)。然而,对于两种,在不同的存储时间没有显着差异。熟鱼片与生鱼片相比,所有值都增加。
 
表6不同贮藏时间的生鱼片和熟鱼片的颜色值
    Diet (D)     Time (T)   Significance RSD1
Colour HI0 HI25 HI50 T1 T3 T6 T9 D T DT  W2  
Raw fillet                        
L*3 33.98 33.29 34.14 45.94a 30.28b 29.78b 29.22b ns *** ns ns 3.13
a*4 -0.25 -0.71 0.04 -0.13 -0.05 0.83 0.21 ns ns ns * 1.41
b*5 4.18 4.05 4.26 3.68 5.24 3.63 4.11 ns ns ns ns 1.67
Chroma6 4.41 4.32 5.01 4.23 5.65 3.99 4.45 ns ns ns ns 1.78
Hue7 97.00 109.01 103.20 100.15 96.16 111.47 104.50 ns ns ns * 17.80
Cooked fillet                        
L* 76.17 74.66 76.46 75.30b 80.71a 74.89b 72.15b ns ** ns ns 4.26
a* -0.44 0.82 1.06 -0.88   -0.61   -0.97 -0.64 ns ns ns ns 0.69
b* 12.59 13.35 13.92 11.94b   15.29a   12.19b 13.73ab ns ** ns ns 2.32
Chroma 12.65 13.44 14.03 12.04b   15.34a   12.31b 13.79ab ns ** ns ns 2.26
Hue 92.79 95.12 95.79 95.53 92.74 96.50 93.50 ns ns ns * 4.18
Means in the same row with different superscript letters are significantly different; ns: not significant; *: p < 0.05; **: p < 0.01; ***: p < 0.001.
* As interaction (DxT) was not significant, each value represents the means for the three diets.
1Residual Standard Deviation; 2Body weight; 3Lightness; 4Redness; 5Yellowness; 6Saturation; 7Perception of colour.


2.2.2 PH、质地、持水性和蒸煮损失
 pH、生鱼片的质感,熟鱼片的质感,WHC和CL分别如图1,2,3,4和5所示,在每一个时间,三种饲料(对照组(HI0) 和实验组(HI25 和HI50) )以平均值计。所有测量的变量在存储时间都有显著的影响(p<0.05)。
关于与在其他存储时间分析的样品相比值(图1),如前所述,储存时间对其有显著影响(P<0.05),平均值在T1为6.37(±0.053),在T3增加到6.46(±0.054),而后在T6(0.058)下降到6.44±(0.048)并在T9再次上升至6.46。饲料对pH值无显著影响。生鱼片的剪切力没有受到饲料的显著影响(图2)。随时间的变化其平均值在T1为119.42 N (± 3.172) , 在T3为11.35 N (± 3.577) ,在T6为 9.37 N (± 2.342) , 在T9为13.47 N (± 2.162)。和生鱼片相同,熟鱼片(图3)的剪切力没有受到饲料的显著影响。平均值有着类似的变化,在T1为9.89 N(±3.846),在T3为12.34 N(±4.713),在T6为6.768 N(±1.569)和在T9为9.173 N(±3.751)。
WHC值(图4),如前所述,存储时间对其均有显著影响(P<0.05)。T1的平均值为86.96%(±2.946),后增加到T3的90.80%(±T3 1.173),后下降到T6的87.97%(±2.270)并在T9(±2.536)再次上升至90.52%,这与pH值出现相同趋势。饲料对WHC无显著影响。
关于CL(图5),储存时间,饲料对所有样品的影响都显著(p<0.05)。HI50组CL值最高,其次是HI25组(与其他组无显著差异),最后是HI0组。对于存储时间,HI组平均值为7.45(±1.683),而HI25组的平均值为9.25(±2.230),且HI50组平均值为10.99(±4.245)。与pH值、剪切力和持水力相反,贮藏时间对CL的影响不显著。



图1每个储存时间实验鱼鱼片的ph值。存储时间上不同字母表示有显著性差异(p<0.05)。未观察到明显的饲料影响。



图2生鱼片的剪切力(n):每一次储存时间生鱼片的平均值。存储时间上不同字母表示有显著性差异(p<0.05)。未观察到明显的饲料影响。



 图3煮熟的鱼片的剪切力(n):每一次储存时间生鱼片的平均值。存储时间上不同字母表示有显著性差异(p<0.05)。未观察到明显的饲料影响。



图4不同饲料组和不同储存时间的生鱼片WHC值(%)。存储时间上不同字母表示有显著性差异(p<0.05)。未观察到明显的饲料影响。



图5不同饲料组和不同储存时间的熟鱼片CL值(%)。不同字母的实验饲料有显著性差异(p<0.05)。贮藏时间无显著影响。


2.2.3化学分析
体成分
表7列出了生鱼片和熟鱼片的近似成分,是按饲料和储存时间分组的个体的平均值表示。饲料、时间及它们的相互作用和体重的影响也在同一张表中表达。生的和熟的鱼片成分没有显著差异,熟鱼片中体重对总脂质有显著影响,而饲料和时间之间的相互作用对生鱼片的粗蛋白(CP)和粗脂肪(EE)有显著影响。相反,除了粗蛋白,时间对生鱼片所有指标都有显著影响。特别是脂质含量(均为新鲜鱼片的醚提取物以及新鲜和熟鱼片的总脂)从存储开始(T1)到结束期间(T9)有下降趋势,而鲜鱼片水分和灰分含量上升。
 
表7投喂实验饲料后不同贮藏时间的生鱼片和熟鱼片的成分(%)
    Diet (D)   Time (T)   Significance RSD1
  HI0 HI25 HI50 T1 T9 D T DT W2  
Raw fillet                    
Water 71.92 71.55 70.84 70.43b 72.44a ns ** ns ns 1.41
Crude protein 19.11 19.47 19.45 19.34 19.34 ns ns * ns 0.41
Ether extract 7.66 7.48 8.29 8.77a 6.85b ns ** * ns 1.31
Ash 1.32 1.36 1.33 1.29b 1.39a ns ** ns ns 0.07
Total lipids 8.05 8.68 9.11 11.64a 7.12b ns *** ns ns 1.46
Cooked fillet                    
Water 71.39 71.20 71.22 71.08 71.44 ns ns ns ns 1.56
Crude protein 20.85 20.95 20.83 20.97 20.78 ns ns ns ns 0.65
Ether extract 6.29 6.63 6.54 6.54 6.43 ns ns ns ns 1.35
Ash 1.37 1.28 1.28 1.33 1.28 ns ns ns ns 0.15
Total lipids 7.16 7.29 7.48 8.44a 6.69 b ns ** ns ** 1.23
Means in the same row with different superscript letters are significantly different; ns: not significant; *: p < 0.05; **: p < 0.01.
1Residual Standard Deviation; 2Body weight.

脂肪酸组成
有关生鱼片脂肪酸的数据见表8。饲料对脂肪酸有显著影响(P<0.01)。一般而言,SFA的含量随着饲料中添加黑水虻蛹粉含量的增加而增加,然而MUFA和PUFA的含量却有所下降。对于SFA方面,月桂酸(C12:0)的含量发生了较大变化,饲喂HI50组饲料的生鱼片中脂肪酸含量最高,而饲喂HI0组饲料的生鱼片中脂肪酸含量则较低。投喂不同组饲料对硬脂酸(C18:0)的含量没有影响。与SFA相反,MUFA的含量随着饲料中添加黑水虻蛹虫粉含量的增加而下降。有显著影响的单一脂肪酸是C18:1n7(异油酸),C20:1n9(鳕鱼酸)和C22:1 n 11(二十碳烯酸)。投喂不同组饲料对C16:1n7(棕榈油酸)和18:1n9(油酸)的含量没有影响。n3系列PUFA的含量随饲料中黑水虻蛹虫粉替代水平的增加而减少。其中C20:5n3(二十碳五烯酸,EPA)和C22:6n(二十二碳六烯酸,DHA)有最显著差异。
在储存时间方面仅C18:0和C16:1n7的含量有显著影响(分别为P <0.01,P <0.05),但没有明显降低或增高的趋势。除C18:0外,不同组饲料与储存时间之间的相互作用不明显。还必须注意的是,体重显著影响了大部分脂肪酸的含量。

表8. 在不同的储存时间,饲喂不同组饲料生鱼片中脂肪酸组成(占总脂肪酸%)
    Diet (D)     Time (T)   Significance RSD1
                       
Fatty HI0 HI25 HI50 T1 T3 T6 T9 D T DT W2
acid                        
C12:0 0.59c 6.08b 11.80a 5.80 6.21 6.36 6.25 *** ns ns ** 0.54
C14:0 3.03c 4.12b 5.27a 4.15 4.21 3.99 4.21 *** ns ns ** 0.44
C16:0 15.01b 15.11b 15.34a   15.14  15.12  15.28 15.06 ** ns ns *** 0.29
C18:0 3.59 3.57 3.56 3.68a   3.47c   3.58b 3.58b ns ** ** *** 0.13
SFA 23.07c 29.63b 36.61a   29.52  29.74  29.97 29.86 *** ns ns *** 0.79
                     
C16:1n7 5.22 5.32 5.48 5.29a   5.52a   5.39a 5.15ab ns * ns ns 0.32
18:1n9 22.01 21.74 21.53 22.15 21.69 21.65 21.56 ns ns ns ** 0.69
C18:1n7 2.78a 2.52b 2.29c 2.55 2.53 2.53 2.50 *** ns ns ns 0.07
C20:1n9 2.50a 2.19b 1.87c 2.22 2.16 2.18 2.16 *** ns ns ** 0.13
C22:1n11 1.40a 1.03b 0.73c 1.07 1.02 1.08 1.05 *** ns ns * 0.11
MUFA 35.40a 34.13b 33.19c   34.67  34.30  34.21 33.79 *** ns ns ns 0.99
                         
C18:2n6 7.74 7.90 7.83 7.98 7.63 7.84 7.85 ns ns ns *** 0.47
PUFAn6 10.16 10.06 9.96 10.19 9.91 10.03 10.11 ns ns ns *** 0.50
                       
C18:3n3 1.86a 1.73b 1.51c 1.73 1.66 1.72 1.69 *** ns ns *** 0.10
C20:5n3 4.35a 3.33b 2.25c 3.27 3.29 3.36 3.33 *** ns ns ns 0.22
C22:5n3 2.49a 1.87b 1.24c 1.91 1.91 1.81 1.84 *** ns ns ns 0.15
C22:6n3 19.47a 16.62b 13.30c   16.15  16.63  16.21 16.86 *** ns ns ns 0.94
PUFAn3 30.28a 25.21b 19.51c 24.70 25.15 24.82 25.33 *** ns ns ns 1.04
                       
Means in the same row with different superscript letters are significantly different; ns: not significant; *: p < 0.05; **: p < 0.01; ***: p < 0.001.
1Residual Standard Deviation; 2 Body weight.
如表9所示,熟鱼片中脂肪酸组成和含量及趋势与生鱼片当中的非常相似。然而,n3系列PUFA含量的略有增加对于MUFA有不利影响。在SFA方面,特别是月桂酸,其含量随着饲料中黑水虻蛹虫粉含量的增加而升高,而饲喂对照组饲料的鱼中n3系列的MUFA和PUFA(特别是EPA和DHA)的含量更高。储存时间及与饲料的相互作用只有在C18:0有显著影响(分别为P<0.05,P<0.01),这表示储存时间影响了C18:0的含量且对三个试验组都有着不同的影响。对于熟鱼片,体重也显著影响了大部分脂肪酸的含量。
为评价鱼片的营养、功能特性,用脂肪酸组成来计算品质指标。计算了生鱼片和熟鱼片的致动脉粥样化指数(AI)、凝血指数(TI)、低胆固醇血症/高胆固醇血脂比(HH)和PUFAn3 / PUFAn6比值,结果列于表10。饲料对生鱼片和熟鱼片的所有指标都有显著影响(P<0.001)。随着饲料中黑水虻蛹虫粉添加量的增加,AI,TI和PUFAn6 / PUFAn3的数值有增加的趋势。与此相反,饲喂对照组饲料的鱼类,HH、PUFAn3 / PUFAn6和PUFA / SFA数值较高,并且呈逐渐降低趋势。存储时间仅在生鱼片中的TI指数上有显著影响(P<0.01),即从T1到T3略有下降,但从T3到T9则保持稳定。然而,关于储存时间与饲料投喂之间的交互显著影响至今尚未见报道。相反,除了生鱼片当中的的TI指数,所有指标都受到体重的显著影响。在生鱼片和熟的鱼片比较当中存在微小差异; 在烹饪的过程当中,PUFA n3 / PUFA n6和PUFA / SFA比值有所增加。

表9. 在不同的储存时间,饲喂不同组饲料熟鱼片中脂肪酸组成(占总脂肪酸%)
    Diet (D)     Time (T)   Significance RSD1
                     
Fatty acid HI0 HI25 HI50 T1 T3 T6 T9 D  T  D´T W1  
C12:0 0.52c 5.76b 11.44a 5.65 5.89 5.87 6.21 *** ns ns ** 0.70
C14:0 3.11c 4.06b 4.85a 3.60 4.16 4.12 4.14 *** ns ns ns 0.75
C16:0 15.02b 15.11b 15.44a   15.18  15.30  15.29 14.98 ** ns ns *** 0.35
C18:0 3.58 3.60 3.60 3.69a   3.51b   3.59ab 3.58ab ns * ** ** 0.13
SFA 23.05c 29.25b 35.98a   28.84  29.59  29.60 29.68 *** ns ns *** 0.97
                         
C16:1n7 5.07 5.12 5.31 5.06 5.35 5.20 5.06 ns ns ns ns 0.31
C18:1n9 21.33 21.13 20.91 21.43 21.00 20.90 21.17 ns ns ns ns 0.68
C18:1n7 2.74a 2.48b 2.25c 2.49 2.51 2.48 2.47 *** ns ns ns 0.07
C20:1n9 2.45a 2.16b 1.83c 2.17 2.13 2.14 2.15 *** ns ns * 0.14
C22:1n11 1.38a 1.04b 0.72c 1.04 1.03 1.07 1.06 *** ns ns ns 0.12
MUFA 34.44a 33.26b 32.30c   33.54  33.38  33.16 33.26 *** ns ns ns 0.97
                         
C18:2n6 7.45 7.61 7.65 7.76 7.29 7.55 7.68 ns ns ns *** 0.48
PUFAn6 9.90 9.87 9.87 10.11 9.64 9.80 9.98 ns ns ns *** 0.54
                         
C18:3n3 1.82a 1.68b 1.48c 1.69 1.60 1.68 1.67 *** ns ns *** 0.10
C20:5n3 4.46a 3.41b 2.35c 3.37 3.39 3.49 3.38 *** ns ns ns 0.26
C22:5n3 2.54a 1.89b 1.31c 1.98 1.91 1.87 1.89 *** ns ns ns 0.15
C22:6n3 20.68a 18.07b 14.82c   18.04  18.01  17.78 17.59 *** ns ns ns 1.00
PUFAn3  31.57a 26.69b 21.15c 26.65 26.50 26.56 26.18 *** ns ns * 1.11
Means in the same row with different superscript letters are significantly different; ns: not significant; *: p < 0.05; **: p < 0.01; ***: p < 0.001.
1Residual Standard Deviation; 2 Body weight.
 
表10. 在不同的储存时间,饲喂不同组饲料生鱼片与熟鱼片中营养指标
    Diet (D)     Time (T)   Significance RSD2
  HI0 HI25 HI50 T1 T3 T6 T9 D T  D´T W2
Raw Fillet                        
AI 0.37c 0.54b 0.77a 0.55 0.57 0.56 0.57 *** ns ns *** 0.03
TI 0.13c 0.17b 0.23a 0.19a 0.17b 0.17b 0.17b *** ** ns Ns 0.01
HH 3.14a 2.72b 2.29c 2.71 2.70 2.71 2.73 *** ns ns *** 0.13
n3/n6 3.00a 2.52b 1.97c 2.45 2.54 2.49 2.51 *** ns ns *** 0.17
n6/n3 0.34c 0.40b 0.51a 0.42 0.41 0.42 0.41 *** ns ns *** 0.02
PUFA /SFA 1.82a 1.23b 0.82c 1.28 1.30 1.29 1.31 *** ns ns *** 0.09
Cooked Fillet                        
AI 0.37c 0.53b 0.73a 0.51 0.56 0.55 0.56 *** ns ns ** 0.05
TI 0.13c 0.15b 0.20a 0.16 0.16 0.16 0.16 *** ns ns ** 0.01
HH 3.14a 2.76b 2.38c 2.85 2.71 2.71 2.77 *** ns ns *** 0.16
n3/n6 3.20a 2.72b 2.15c 2.66 2.76 2.73 2.63 *** ns ns *** 0.18
n6/n3 0.31c 0.37b 0.47a 0.39 0.38 0.38 0.39 *** ns ns *** 0.02
PUFA/SFA 1.87a 1.29b 0.88c 1.37 1.34 1.33 1.35 *** ns ns *** 0.08
Means in the same row with different superscript letters are significantly different; ns: not significant; ***: p < 0.001.; 1Residual Standard Deviation; 2Body weight.

2.2.4脂质过氧化物
有关于CD,TD和TBARS的数据分别显示在图6,7和8中,分别为对照组饲料(HI0)和试验组饲料(HI25和HI50)的平均值。关于鱼片中CD水平如图6所示,尽管没有观察到投喂试验饲料对CD有显著影响,但在T1时其平均值在较高黑水虻粉替代组降低。与此相反,在T9时,其平均值随黑水虻粉替代水平的增加呈先降低后升高的趋势,在HI25组最低。此外,无论投喂何组试验料,T9时的鱼片CD水平高于T1时。鱼片中CT含量的平均值(图7)与CD含量的平均值有相同的趋势,除了HI25组的鱼的鱼片,其他组的CT平均值从T1至T9有下降趋势。尽管如此,研究显示投喂不同组饲料对CD有显著影响,其中HI0组的平均值与其他试验组相比有显著差异。关于鱼片中氧化副产物TBARS的含量如图8所示,无论储存时间如何,其平均值随着饲料中黑水虻蛹虫粉替代水平的增加而降低。相反,无论投喂何组饲料,从T1到T9,氧化副产物的平均值都有增加。
插入图13
图6. 在不同的储存时间,饲喂不同组饲料的CD值(mg CD/kg 样品)。各组差异不显著
插入图14
图7. 在不同的储存时间,饲喂不同组饲料的CT值(mg CT/kg 样品)。各组不同字母代表差异显著(P<0.05)。
插入图15
图8. 在不同的储存时间,饲喂不同组饲料的TBARS值(mg MDA/kg 样品)。各组差异不显著。

2.2.5总游离氨基酸
表11和12分别列出了投喂试验粮的鱼的生鱼片中TAA组成和游离脂肪酸的数据。关于TAA,只有赖氨酸显著受试验料的影响(P<0.05)。关于FAAs,试验料能显著影响EAAs当中的精氨酸(P<0.05)以及非EAAs当中的天冬氨酸(P<0.01)和丝氨酸(P<0.01)关于FAAs,显著性受试验料影响的EAAs为精氨酸(P<0.05)和甲硫氨酸(P<0.01),而显著性受试验料影响的非EAAs为天冬酰胺(P<0.01)和丝氨酸(P<0.01)。
表11饲喂不同组饲料生鱼片中总氨基酸组成(%)
1Residual Standard Deviation; ns: not significant; *: p < 0.05.
 
表12饲喂不同组饲料生鱼片中游离氨基酸组成(%)


1Residual Standard Deviation; ns: not significant; *: p < 0.05; **: p < 0.01
 
3.结论
水产养殖的发展将取决于寻找能替代鱼粉的蛋白来源,因为目前鱼粉的使用量威胁到了水产养殖业的持续发展。据我们所知,这是第一个评估在饲料中添加黑水虻蛹虫粉对鱼肉物理特性和品质性状的研究。本研究结果表明,不论黑水虻蛹虫粉替代水平如何,均不影响鱼肉的形态特征、商品性和生理特性,包括鱼肉的颜色、PH值、质地和保水性等。尽管如此,随着饲料中黑水虻蛹虫粉替代水平的增加,烹煮后的鱼片中营养损失量也随之增加,但生鱼片和熟鱼片中的组成成分却不受饲料的影响。与此相反,饲料中虫粉替代鱼粉显著影响了鱼肉中的脂肪酸组成以及TI,AI,HH,PUFAn3 / PUFAn6和PUFA / SFA等指标。饲料中加入黑水虻蛹虫粉后鱼肉中饱和脂肪酸含量增加,而MUFA和LC-PUFA(特别是EPA和DHA)的含量随着黑水虻蛹虫粉的加入而下降。有趣的是,肌肉脂质过氧化物随着饲料中黑水虻蛹虫粉的添加而下降。正如预期,储存时间的增加对几乎所有的试验组都有负面影响。总之,这项研究的结果非常具有前景:对于养殖虹鳟来说,黑水虻蛹虫粉似乎是一个很好的新型蛋白来源。需要进一步的研究来探讨黑水虻蛹虫粉的营养价值,尤其是在脂肪酸方面。总言而知,黑水虻替代饲料中50%鱼粉对虹鳟的肉品质性状影响不大。然而,在投喂加入了黑水虻蛹虫粉的饲料鱼的肌肉中显示饱和脂肪酸有所增加,而单不饱和脂肪酸和长链多不饱和脂肪酸有所降低,使得脂质过氧化物减少。
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